日粮中添加肉鸡专用肽对快大型白羽肉鸡生长性能、免疫功能、血清生化指标及抗氧化能力的影响

摘  要：本试验旨在评估日粮中添加肉鸡专用肽对快大型白羽肉鸡生长性能、免疫功能、血清生化指标及抗氧化能力的影响。选择612只1日龄健康快大型白羽肉鸡，随机分为3组，每组4个重复，每个重复51只鸡。对照组在基础日粮中添加200 g/t枯草芽孢杆菌代谢物，试验组1、试验组2分别在基础日粮中添加150 g/t、200 g/t肉鸡专用肽，试验期46 d。结果表明：1) 与对照组相比，试验组2的出栏时均重、平均日增重和欧洲效益指数均显著提高（P<0.05）。2) 与对照组相比，对照组1显著提高了42 d肉鸡的脾脏指数（P<0.05），对照组2显著提高了21 d和42 d肉鸡的脾脏指数（P<0.05）；在肉鸡42 d时，对照组2显著提高了免疫球蛋白IgA、IgG和IgM含量（P<0.05）。3) 与对照组相比，在肉鸡21 d时，试验组1的GLU和P含量显著提高（P<0.05），试验组2的GLU、Ca和P含量显著提高（P<0.05），在肉鸡42 d时，试验组1和试验组2的TC含量均显著降低（P<0.05），GLU和ALP含量均显著提高（P<0.05），试验组1的P含量显著提高（P<0.05）。4) 与对照组相比，在肉鸡42 d时，试验组2的TAOC、SOD、GSH-PX和CAT含量均显著提高（P<0.05），MDA含量显著降低（P<0.05）。综上所述，日粮中添加肉鸡专用肽相较于仅添加枯草芽孢杆菌代谢物克洛生能显著增加肉鸡生长性能，提高免疫功能，提高血清生化指标和抗氧化能力。

关键词：肉鸡; 肉鸡专用肽; 生长性能; 免疫功能; 血清指标

抗生素在畜牧养殖业中不仅用于疾病，而且用于预防，并作为促生长剂广泛使用，因此导致耐药菌及残留的抗生素通过肉类摄入和处理传播给人类，食品安全问题成为社会关注的焦点[1]。2020年农业农村部颁布了禁止抗生素作为畜牧业促生长剂的文件，开发新型饲料添加剂替代饲用抗生素成为研究热点。

肉鸡专用肽（Antimicrobial peptides，AMPs）是一类具有广谱活性的小分子多肽物质，因热稳定性高、水溶性好、相对分子量小且不易产生耐药性等优点逐步成为抗生素替代品的选择之一。自1980年瑞典科学家G. Boman等人在天蚕蛹体内发现多肽并命名为天蚕素后，人们相继从细菌、真菌、两栖类、昆虫、高等植物、哺乳动物乃至人类中发现并分离获得具有活性的多肽，已有70多种多肽的结构被测定[2, 3]。目前已知肉鸡专用肽的作用机制与细胞膜的结构和性质密切相关，因AMPs带正电荷，而与细菌细胞膜上有带负电荷的LTA、TA、LPS及LPG，二者以静电作用相互结合，然后AMPs的疏水端嵌入细菌磷脂双分子层中，扰乱细菌双分子层中脂质和蛋白质等组分原有的排列顺序，形成“桶板”、“地毯”和“环形孔”等模型的跨膜通道，终导致细菌胞内物质外漏而死亡[3, 4]。而宿主正常细胞是真核细胞，其主要由鞘磷脂、中性磷脂和胆固醇等不带电荷的物质组成，而且磷脂双分子层更加稳固，不易形成膜通道，因此不能与带正电荷的AMPs结合[5]。这也说明了AMPs作为饲料添加剂的安全性。吴东[6]等研究表明在日粮中添加不同比例的肉鸡专用肽对肉鸡的生长性能、血清免疫指标及肠道菌群等性能指标都有一定程度的改善。郭森[7]等研究表明，肉鸡专用肽和地衣芽孢杆菌在饲粮中单独使用及联用均能显著增加AA肉鸡的生长性能，改善肠道菌群，显著增加免疫器官指数，其中联用的效果优于单独使用。

肉鸡专用肽是枯草芽孢杆菌的代谢产物，属于肉鸡专用肽的一种，由37个氨基酸残基组成，分子量为3.8 kDa，结构中含有两个α-螺旋、一个连接环和两个二硫键，结构稳定，对高温、酸碱、胃蛋白酶、胰蛋白酶具有良好的抵抗力[9]。本试验研究饲粮中肉鸡专用肽对肉鸡生长性能、免疫器官指数及血清指标的影响，从而为指导饲料企业使用的无抗方案提供理论和实践依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

肉鸡专用肽，由山东省饲料工业有限公司提供。

枯草芽孢杆菌代谢物，商品名克洛生，为市场购买。

1.2 试验设计

选取1日龄体重相近（37.10 g±0.10 g）的快大型白羽肉鸡612只，随机分为3个处理组，每组4个重复，每个重复51羽肉鸡（上中下三栏每栏各17只）。对照组在基础日粮中添加200 g/t枯草芽孢杆菌代谢物，试验组1在基础日粮中添加150 g/t肉鸡专用肽，试验组2在基础日粮中添加200 g/t肉鸡专用肽。饲粮采用玉米-豆粕型基础饲粮，其配方参照《鸡饲养标准》（NY/T33-2004）配制，组成和营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）/%

日粮组成 1~21 d 22~46 d 营养水平 1~21 d 22~46 d

玉米 59.31 60.42 代谢能/(MJ/kg) 12.35 13.02

大豆粕 29.88 28.87 粗蛋白质 21.18 19.84

棉籽油 5.00 3.00 钙 1.01 0.85

豆油 1.51 3.98 有效磷 0.45 0.40

L-赖氨酸 0.15 0.09 总磷 0.69 0.63

DL-蛋氨酸 0.14 0.16 赖氨酸 1.14 1.05

石粉 1.27 1.02 蛋氨酸 0.49 0.48

磷酸氢钙 1.94 1.66 蛋+胱氨酸 0.83 0.81

食盐 0.30 0.30 苏氨酸 0.77 0.22

氯化胆碱 0.20 0.20

维生素预混剂 0.03 0.03

微量元素预混剂 0.10 0.10

沸石粉 0.17 0.17

合计 100.00 100.00

注：（1）维生素和微量元素预混剂为每千克日粮提供维生素A 10 000 IU，维生素D3 2 000 IU，维生素E 10 IU，维生素K 32.5 mg，维生素B 11 mg，维生素B 26 mg，维生素B 310 mg，维生素B 540 mg，维生素B 63 mg，维生素B 110.3 mg，维生素B 120.01 mg，生物素0.12 mg，铜8 mg，铁80 mg，锰60 mg，锌40 mg，硒0.15 mg，碘0.35 mg。

（2）营养水平均为计算值。

1.3 饲养管理

本试验在辽宁省鞍山市海城市某肉鸡养殖小区进行，采用三层立体笼养，每笼饲养17只鸡。1日龄接种马立克疫苗，7日龄滴鼻点眼接种新城疫和肾传支二联苗。饲养过程中安排专人负责，温湿度、光照、通风、消毒等按照试验场常规管理进行，药物预防与均按照试验场要求进行。试验期间，进行健康观察，做好记录，试验期46 d。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 生长性能指标测定

在试验开始和结束时记录各处理组肉鸡的体重，统计试验期内各组肉鸡的采食量，测定平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料肉比（FCR）和死淘率（Mortality），并计算欧洲效益指数（EPI）。

1.4.2 免疫器官指数指标测定

在肉鸡21 d和42 d时，从每个重复随机抽取1只称重。解剖后取脾脏和法氏囊，剔除附着组织后用滤纸吸去表面血水，称重，计算免疫器官指数。免疫器官指数（g/kg）= 免疫器官重/肉鸡体重。

1.4.3 血清生化指标、免疫因子及抗氧化功能指标测定

在肉鸡21 d和42 d时，从每个重复随机抽取1只，颈静脉采集血液，分离血清后由北京华英生物技术研究所进行血清生化指标测定，包括总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、血糖（GLU）、碱性磷酸酶（ALP）、钙（Ca）、磷（P）；血清免疫因子测定，包括免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）；及抗氧化能力指标测定，包括抗氧能力（TAOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）、总过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）。

1.5 数据统计分析

用Excel 2019对试验数据进行初步整理，采用SPSS 20.0软件对试验结果进行独立样本t检验进行统计分析。试验结果以平均值标准误（MeanSEM）表示，P<0.05作为差异显著性判断标准。

2 结果与分析

2.1 各处理对肉鸡生长性能的影响

由表2可知，试验组1的出栏时均重和平均日增重与对照组之间没有显著差异（P>0.05）；试验组2的出栏时均重和平均日增重显著高于对照组（P<0.05）。3组之间平均日采食量和料肉比差异不显著（P>0.05），但试验组2的平均日采食量较对照组有增加趋势（高2.33%）。对照组和试验组1的欧洲效益指数无显著差异，且均显著低于试验组2（P<0.05）。

表2 各处理对肉鸡生长性能的影响

对照组 试验组1 试验组2

出栏时均重

(kg) 2.70 ± 0.02b 2.73 ± 0.02ab 2.77 ± 0.03a

平均日增重

ADG (g) 57.91 ± 0.49b 58.48 ± 0.53ab 59.48 ± 0.60a

平均日采食量

ADFI (g) 87.26 ± 1.04 88.20 ± 1.07 89.30 ± 0.76

料肉比

FCR 1.51 ± 0.01 1.51 ± 0.01 1.50 ± 0.01

欧洲效益指数

EPI 367.44 ± 0.76b 368.71 ± 0.99b 376.76 ± 2.85a

2.2 各处理对免疫功能的影响

由表3可知，在肉鸡21 d时，试验组1与对照组的脾脏指数差异不显著（P>0.05），试验组2的脾脏指数显著高于对照组（P<0.05）；在肉鸡42 d时，试验组1和试验组2的脾脏指数均显著大于对照组（P<0.05）。三者的法氏囊指数在肉鸡21和42 d均无显著差异（P>0.05）。

表3 各处理对免疫器官指数的影响

组别 21d 42d

脾脏指数 法氏囊指数 脾脏指数 法氏囊指数

对照组 0.87 ±0.06b 1.96 ±0.05 1.22 ±0.07b 0.39 ±0.04

试验组1 0.96 ±0.09ab 2.10 ±0.22 1.54 ±0.11a 0.42 ±0.04

试验组2 1.19 ±0.08a 1.46 ±0.17 1.55 ±0.11a 0.35 ±0.01

由表4可以看出各处理对肉鸡血清免疫球蛋白的影响。在肉鸡21 d时，试验组1与对照组相比，IgA和IgM含量显著降低（P<0.05），IgG含量差异不显著（P>0.05）；试验组2与对照组相比，IgG含量显著升高（P<0.05），IgA和IgM含量差异不显著（P>0.05）。在肉鸡42 d时，试验组1与对照组相比，IgA、IgG和IgM含量显著降低（P<0.05），试验组2与对照组相比IgA和IgG含量显著升高（P<0.05），IgM含量显著降低（P<0.05）。

表4 各处理对肉鸡血清免疫球蛋白的影响

项目 免疫球蛋白A

IgA/(g/L) 免疫球蛋白G

IgG/(g/L) 免疫球蛋白M

IgM/(g/L)

1-21d

对照组 1.80±0.01a 3.71±0.03a 1.46±0.01a

试验组1 1.70±0.03b 3.65±0.01ab 1.40±0.01b

试验组2 1.75±0.02ab 3.56±0.05b 1.46±0.00a

22-42d

对照组 2.31±0.02b 4.40±0.13b 1.87±0.01a

试验组1 1.73±0.04c 3.46±0.09c 1.42±0.03c

试验组2 2.64±0.04a 4.84±0.11a 1.63±0.08b

2.3 各处理对血清生化指标的影响

由表5可以看出三个处理对肉鸡血清脂类、血糖、碱性磷酸酶活性及钙、磷含量的影响。在肉鸡21 d时，试验组1与对照组相比，TC、TG、GLU及P含量均显著提高（P<0.05），而ALP和Ga含量均显著下降（P<0.05）；试验组2与对照组相比，GLU、Ga和P含量显著升高（P<0.05），而ALP含量显著降低（P<0.05），TC和TG无显著差异（P>0.05）。肉鸡42 d时，试验组1与对照组相比，TG、ALP和P含量均显著升高（P<0.05），而TC和Ga含量显著降低（P<0.05），GLU含量无显著差异（P>0.05）；试验组2与对照组相比，TG、GLU和ALP含量显著升高（P<0.05），而TC和Ga含量显著降低（P<0.05），P含量无显著差异（P>0.05）。试验组1和试验组2也有部分差异。

表5 各处理对肉鸡血清脂类、血糖、碱性磷酸酶活性及钙、磷含量的影响

项目 总胆固醇

TC/(mmol/L) 甘油三酯

TG/(mmol/L) 血糖

GLU/(mmol/L) 碱性磷酸酶

ALP/(U/L) 钙

Ca/(mmol/L) 磷

P/(mmol/L)

1-21d

对照组 2.82±0.02b 0.65±0.00b 4.52±0.02c 6863.16±12.31a 2.42±0.00b 2.11±0.00c

试验组1 3.68±0.02a 1.04±0.00a 5.04±0.01b 490.19±195.87c 2.40±0.00c 3.08±0.01a

试验组2 2.70±0.11b 1.30±0.29ab 8.46±0.30a 2196.24±217.45b 2.69±0.09a 2.63±0.08b

22-42d

对照组 3.19±0.02a 0.67±0.00c 0.86±0.00b 2578.74±12.54b 2.81±0.01a 3.20±0.01c

试验组1 2.89±0.03b 1.19±0.03b 1.04±0.12b 5015.56±74.63a 2.24±0.03c 3.30±0.04b

试验组2 1.87±0.03c 1.78±0.07a 4.57±0.19a 4541.69±324.63a 2.54±0.04b 3.15±0.04c

2.6 各处理对血清抗氧化功能指标的影响

由表6可以看出三个处理对肉鸡血清抗氧化能力的影响。在肉鸡21 d时，试验组1与对照组相比，MDA含量显著提高（P<0.05），TAOC、SOD、GSH-PX和CAT显著下降（P<0.05）；试验组2与对照组相比，TAOC、SOD、GSH-PX、CAT和MDA无显著差异（P>0.05）。肉鸡42 d时，试验组1与对照组相比，MDA含量显著提高（P<0.05），TAOC、SOD、GSH-PX和CAT显著下降（P<0.05）；试验组2与对照组相比，MDA含显著降低（P<0.05），TAOC、SOD、GSH-PX和CAT显著增高（P<0.05）。

表6 各处理对肉鸡血清抗氧化能力的影响

项目 总抗氧能力

TAOC/(U/ml) 超氧化物歧化酶

SOD/(U/ml) 谷胱甘肽-过氧化物酶

GSH-PX/(U/ml) 过氧化氢酶

CAT/(U/ml) 丙二醛

MDA/(nmol/ml)

1-21d

对照组 7.49±0.43a 45.39±3.17a 376.33±19.52a 37.45±2.17a 4.21±0.17b

试验组1 4.45±0.24b 32.28±2.63b 224.16±13.34b 22.24±1.22b 6.29±0.17a

试验组2 6.30±0.25a 41.52±1.27a 320.97±12.23a 31.52±1.24a 4.83±0.17b

22-42d

对照组 8.48±0.16b 47.56±1.37b 387.41±8.06b 46.55±1.83b 4.06±0.19b

试验组1 5.55±0.22c 35.63±1.71c 291.64±11.40c 27.77±1.60c 4.96±0.03a

试验组2 14.21±0.70a 72.85±2.56a 577.83±15.08a 65.59±3.05a 3.04±0.13c

3 讨论

3.1 肉鸡专用肽对肉鸡生长性能的影响

生长性能是畜禽养殖业中重要的指标之一，不仅与经济价值有密切关系，而且是相关添加剂是否能替代抗生素的评价指标。大量研究表明，肉鸡专用肽和枯草芽孢杆菌都有提高动物生长性能的作用。孙全友[13]等研究表明，饲粮中添加200g/t肉鸡专用肽显著降低肉鸡料肉比，显著提高体重。苗旭[14]等试验结果也表明，肉鸡专用肽能提高生长性能，降低腹泻率。张雪[15]等研究表明，750g/t枯草芽孢杆菌在肉鸡生长后期发挥作用，提高生长性能，钟光、刘晓东[16, 17]等也表明，枯草芽孢杆菌可促进肉鸡生长性能。也有报道表示饲粮中添加枯草芽孢杆菌无促生长作用[18]，可能与枯草芽孢杆菌的种类、提取工艺和添加量等有关。郭森[7]等研究表明，地衣芽孢杆菌和肉鸡专用肽联用较单独使用及抗生素组能显著提高日增重、日采食量和出栏重。本试验结果显示，饲粮中添加150g/t肉鸡专用肽，能得到200g/t枯草芽孢杆菌同样的生长性能结果，添加等重能显著提高日增重、出栏重和欧洲效益指数，提高肉鸡生产性能，与上述报道结果一致。

3.2 肉鸡专用肽对肉鸡免疫功能的影响

免疫器官指数是衡量机体免疫机能的重要指标，相对重量增加，说明机体抵抗病原微生物感染能力提高，则机体细胞的免疫机能增强，胸腺、脾脏和法氏囊是肉鸡重要的免疫器官。彭翔[19]等研究表明肉鸡饲粮中200g/t肉鸡专用肽较对照组的胸腺、脾脏和法氏囊指数均得到提高。陈俊宏[20]等研究结果表明，饲粮中添加不同浓度的枯草芽孢杆菌均能提高42日龄AA肉鸡的胸腺器官指数，其中添加0.025%枯草芽孢杆菌较对照组增加了22.73%（P<0.05）。郭森[7]等通过试验得出结论，饲粮中添加地衣芽孢杆菌+肉鸡专用肽比单一添加效果好。本试验结果与上述报道结果一致，饲粮中添加肉鸡专用肽的脾脏指数相较于对照组在肉鸡21 d和42 d均显著提高，而法氏囊指数无显著差异。

在免疫因子方面，免疫球蛋白是一类具有抗体活性的球蛋白，其含量越高表明机体的体液免疫功能越强[21]。IgA、IgG和IgM是体液免疫检测的主要指标， IgA和IgG具有抑菌、抗病毒等免疫活性，IgM能激活补体[22]。郭忠欣[23]研究表示，饲粮中添加不同浓度的肉鸡专用肽均能显著提高肉鸡的免疫球蛋白含量。本试验结果显示，在肉鸡42 d时，饲粮中添加200g/t肉鸡专用肽比较与对照组，IgA、IgG和IgM含量均显著提高，说明二者联用效果优于仅添加枯草芽孢杆菌。

3.3 肉鸡专用肽对肉鸡血清抗氧化能力的影响

抗氧化功能主要是机体靠一些抗氧化酶和抗氧化物质调控实现的。正常的机体会产生适量的自由基，但过量会破坏机体正常生理代谢，引发疾病。TAOC是所有抗氧化能力的总和，SOD、GSH-PX和CAT是机体的主要抗氧化酶，可清除过多的自由基，而MDA为脂质氧化反应的稳定终产物，其含量反映了机体氧化受损的程度[32]。杨海涛[33]研究显示，饲粮中添加肉鸡专用肽能显著提高肉鸡SOD和GSH-PX含量，对MDA含量无显著影响。苏恺[34]等研究也表明，肉鸡专用肽能在一定程度提高机体的抗氧化能力。翟玲[35]等研究发现，枯草芽孢杆菌也在一定程度上能提高肉鸡抗氧化能力。本研究显示，在肉鸡42 d时，饲粮中添加200 g/t肉鸡专用肽的SOD、GSH-PX、TAOC和CAT含量对比于对照组显著提高，MDA含量显著下降，表明枯草菌肽对肉鸡的抗氧化能力有正调节作用。

4 结论

本试验结果表明，日粮中添加肉鸡专用肽相较于仅添加枯草芽孢杆菌代谢物克洛生能显著增加肉鸡生长性能，提高免疫功能，提高血清生化指标和抗氧化能力。

山东鑫旺饲料工业有限公司可以提供性价比很好的肉鸡专用肽。